Observación de la división celular

PRÁCTICA Nº 8                  

OBSERVACIÓN DE LA DIVISIÓN CELULAR (MITOSIS)

Objetivo

·         Practicar el manejo del microscopio óptico

·         Aprender a extraer y preparar las células de un tejido vegetal para su observación

·         Aprender una técnica de tinción de tejidos biológicos

·         Observar las distintas fases de la división celular (mitosis)

Fundamento Teórico

Buscar información y desarrollar los siguientes puntos:

·         Funcionamiento del microscopio óptico

·         Teoría celular

·         Ciclo celular: Mitosis

Material 

·         Vidrio reloj

·         Bisturí

·         Pinzas madera

·         Papel de filtro

·          Cebolla

·         Mechero

·         Orceína A y B

·         Pinzas 

Protocolo

1.       Preparación previa Tres o cuatro días antes de la práctica de laboratorio, hay que hacer crecer las raíces de la cebolla. Para ello colocar la cebolla sobre un vaso con agua de modo que sólo la parte inferior de la cebolla quede en contacto con el agua

2.        Extracción de la muestra Seleccionar una raíz de la cebolla que no esté seca, que esté creciendo. Cortar los dos últimos milímetros del ápice (el extremo), ya que allí se encuentra la cofia, que no posee células en división y descartarlos. A partir de ahí hacer cortes muy finos

3.        Tinción de la muestra Depositar la muestra obtenida sobre un vidrio de reloj en el que previamente se han puesto unas gotas de orceína A. Dejamos que se tiña durante 10 minutos

4.       Fijación de la muestra Coger el vidrio de reloj con las pinzas de madera y pasarlo por encima de la llama del mechero Bunsen dando suaves pasadas durante unos 5 minutos evitando la ebullición. Si se observa que salen vapores retirar del fuego para evitar que se queme la muestra. Evitar que la orceína se acerque al borde del vidrio de reloj porque podría arder en contacto con la llama

5.       Montaje de la muestra Colocar la muestra sobre el portaobjetos, añadir unas gotas de orceína B y colocar encima el cubreobjetos con cuidado. Doblar varias veces un trozo de papel de fitro y presionarlo suavemente sobre el cubreobjetos para separar las células

6.       Observación al microscopio Colocar el portaobjetos en la pletina del microscopio y observar primero con el objetivo de 10X (100 aumentos) y luego con el de 40X (400 aumentos). Buscar células en las distintas fases de ciclo celular.

Resultados

1.       Observación, dibujo y descripción

Metafase I:  se deja de visualizar el núcleo y las parejas de cromosomas homólogos se colocan en el ecuador de la célula.

Profase I: los cromosomas, con dos cromátidas cada uno se unen fuertemente por parejas de homólogos y, a la vez, se van condensando. En esta unión se da el fenómeno de entrecruzamiento, en el que se ponen en contacto fragmentos de cromátidas de los cromosomas homólogos. Se empieza a desorganizar la envoltura nuclear y se forma el huso en el citoplasma