Fundamento teórico
Los cloroplastos deben su color verde
a un pigmento denominado clorofila. Sin embargo, lo que en realidad existe en
los cloroplastos es una mezcla de pigmentos representados principalmente por
dos tipos de clorofila (clorofila a y
clorofila b), por β caroteno y por xantofila.
Todas estas sustancias presentan un
grado diferente de solubilidad, lo cual permite su separación cuando una
solución de la misma asciende por capilaridad por una tira de papel poroso
(papel de filtro), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad,
pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste va ascendiendo. De
esta forma, al cabo de cierto tiempo, a lo largo del papel de filtro se irán
situando los distintos pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto más
desplazadas cuanto más solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto más
anchas cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla.
ü Mortero.
ü Arena de cuarzo o sal gorda.
ü Placa Petri.
ü Papel de filtro.
ü Matraz.
ü Embudo de vidrio y embudo de papel.
ü Alcohol de 96º
ü Hojas de espinaca, perejil, hierbabuena, etc
.
1. Extracción de pigmentos:
-
Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas (quitando las
nerviaciones más gruesas) junto con 50 o 60 cm3 de alcohol de 90º C
y una cucharadita de arena. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera
una coloración verde intensa.
Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas (quitando las
nerviaciones más gruesas) junto con 50 o 60 cm3 de alcohol de 90º C
y una cucharadita de arena. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera
una coloración verde intensa.
Filtrar, recogiendo el filtrado en un
matraz. Se obtiene así una solución de pigmentos en alcohol.
2.
Separación
de los pigmentos:
-
La solución antes
obtenida se vierte sobre una placa Petri.
-
Se
coloca un papel de filtro doblado en ángulo sobre la solución(15 cm de ancho
por 10 cm de alto) y se deja en reposo el tiempo necesario, para que los
distintos pigmentos asciendan a su través.
-
Transcurrido
el tiempo, retiramos la tira de papel de .la placa petri y observamos las
marcas dejadas por los distintos pigmentos y procedemos a identificarlos.
- ●Haz un dibujo del cromatograma obtenido,
pon el nombre del pigmento que corresponde a cada banda coloreada,
sabiendo que la velocidad de difusión de cada uno de ellos es la siguiente
de mayor a menor: β caroteno, xantofila, clorofila a, clorofila b.
- ●¿Por qué empleamos alcohol para extraer la
clorofila?
Porque
el alcohol es un disolvente polar, aquel que tiene una alta
constante dieléctrica, en decir, son capaces de disolver
sustancias polares, al contrario que los disolventes apolares
que disuelven sustancias apolares.
- ●¿Qué pigmentos son los más
abundantes?¿Cuáles se disuelven mejor en el alcohol?
Clorofila a y b.
Clorofila b
- ●Si añadiésemos benceno a la
solución alcohólica inicial, el benceno se teñiría de verde y la solución
alcohólica quedaría de color amarillo naranja. ¿Qué nos indicaría esto?
El benceno es igual que el colesterol. No
tiene afinidad por lo que no va a permitir que los pigmentos suban por el papel
del filtro.
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