Frotis sanguíneo

PRÁCTICA Nº 16                 FROTIS SANGUÍNEO 

Objetivo 

• Observación e identificación de las células sanguíneas. 
• Manejo del microscopio. 
• Técnicas de tinción. 

Material  

• Microscopio 
• Portas y cubre-objetos 
• Lanceta estéril 
• Alcohol 
• Azul de metileno 
• Sangre 

Protocolo 

1. Limpiar el pulpejo del dedo con una gota de alcohol, hacer una punción para conseguir una gota de sangre.
2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien limpio.
3. Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace un frotis o extensión de sangre. 
***El porta con el que se hace la extensión debe deslizarse bien colocado y lo más perfectamente aplicado en su borde contra el otro porta sobre el que se hace la extensión. Sólo debe pasarse una vez, de forma continua e ininterrumpida.


Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar para la tinción la mejor lograda.  Las extensiones o frotis deben se facilita con movimiento en forma de abanico, nunca sopl desecación evita la deformación de los glóbulos sanguíneos. Técnica de la Tinción.:
1. Depositar el porta con la extensión de sangre encima del la cubeta.
2. Dejar caer sobre la extensión unas gotas de con lo que se consigue el
3. Depositar cubriendo toda la extensión, unas desecación) y dejar actuar el colorante unos
4. Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el colorante.
5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
6. Colocar cubre.

Observación al Microscopio:
1. Con débil aumento explorar la preparación para l perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe u
2. En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los hematíes o eritrocitos , teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los la presencia de núcleo. Hay varias clases de glóbulos blancos:
o los linfocitos algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso que ocupa casi todo el glóbulo
o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que desplazarse por la preparación para encontrar alguno. Tienen un núcleo muy grande y redondeado

Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar para la tinción la
Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo más rápidamente posible. La desecación se facilita con movimiento en forma de abanico, nunca soplando o por calor. La rápida desecación evita la deformación de los glóbulos sanguíneos.
sitar el porta con la extensión de sangre encima del soporte de tinciones
Dejar caer sobre la extensión unas gotas de metanol y esperar que el alcohol se evapore, con lo que se consigue el fijado.
Depositar cubriendo toda la extensión, unas gotas de Azul de Metileno y dejar actuar el colorante unos 2 minutos.
Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el colorante.
Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la
ón al Microscopio:
Con débil aumento explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis es más perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos más fuertes.
En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los , teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia de núcleo. Hay varias clases de glóbulos blancos:
algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso que ocupa casi todo el glóbulo.
son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que desplazarse por la preparación para encontrar alguno. Tienen un núcleo muy grande y redondeado. (Recordar que  su función es la de fagocitosis).

Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar para la tinción la
lo más rápidamente posible. La desecación ando o por calor. La rápida
soporte de tinciones y éste sobre
y esperar que el alcohol se evapore,
zul de Metileno, (evitar la
Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la
ocalizar la zona en la que el frotis es más perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los na zona apta, pasar a aumentos más fuertes.
En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, , teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el de identifican fácilmente por
algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso
son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que desplazarse por la preparación para encontrar alguno. Tienen un núcleo muy es la de fagocitosis).

o los polinucleares presentan el núcleo como fragmentado o con aspecto arrosariado.
o los eosinófilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el núcleo teñido de color azul marino. Estos glóbulos aumentan su número en caso de parasitosis o procesos alérgicos.
o los basófilos presentan un núcleo teñido y  granulaciones en el  citoplasma.
o Las plaquetas aparecen como pequeños fragmentos teñidas. Estas células intervienen en el proceso de coagulación sanguínea.

3. El número promedio de glóbulos rojos en el hombre es de 5.000.000 por mm3 de sangre. La cifra media de glóbulos blancos es de 7.000 a 8.000 por mm3. Hay por tanto un glóbulo blanco por cada 600 ó 700 glóbulos rojos. Por lo tanto para ver todos los tipos de glóbulos blancos debes buscarlos en distintos campos de la preparación. El número de plaquetas es de unas 250,000 por mm3