PRÁCTICA Nº 5
“OBSERVACION DE BACTERIAS DEL YOGUR”
INTRODUCCIÓN
Las bacterias, junto con las cianobacterias (antiguas algas
cianofíceas) constituyen el Reino Monera. Todos son organismos procariotas
unicelulares.
Las células procariotas tienen un origen anterior a las eucarióticas
en la evolución. Se diferencian de las eucariotas en que:
·
No tienen núcleo diferenciado: su material hereditario no está
separado del citoplasma por una membrana.
·
Carecen de muchos orgánulos propios de las células eucarióticas.
·
Su tamaño es menor: Las bacterias miden de 0,2 a 5 micrómetros y las células
eucarióticas de 1 a 20 micrómetros.
Dentro de las bacterias se pueden distinguir diferentes tipos:
Ø Según su
nutrición hay bacterias:
o
Autótrofas:
§ Fotosintetizantes
§ Quimiosintetizantes
o
Heterótrofas:
§ Saprófitas, que
descomponen la materia orgánica mediante putrefaccciones y fermentaciones.
§ Simbióticas, en
simbiosis con otros organismos, como las de nuestra flora intestinal o el
Rhizobium de la raiz de las leguminosas.
§ Parásitas, que provocan enfermedades, como la
tuberculosis, cólera, tifus, tétanos, etc.
Todas las heterótrofas, según que utilicen oxigeno puro o no lo usen,
se pueden dividir en aerobias (que lo usan) y anaerobias (que no lo usan; para
algunas de estas el oxigeno es un veneno).
Ø Según su forma se
distinguen:
o
Cocos: con forma esférica, que pueden aparecer aislados o en parejas
Diplococos: alineados: estreptococos: o en racimos: estafilococos
o
Bacilos: con forma alargada. A veces se encuentran en cadenas,
estreptobacilos
o
Vibrios o vibriones: cortos y curvados, en forma de coma
o
Espirilos: con forma de hélice
Las bacterias tienen una gran importancia, no solo porque hay algunas
perjudiciales, sino por las que son beneficiosas e incluso necesarias.
Las bacterias de la putrefacción y algunas quimiosintetizantes (las del
nitrógeno, por ejemplo) son pasos importantes en la circulación o reciclaje de
la materia en la naturaleza.
Muchas bacterias son utilizadas por la humanidad con fines
industriales, como las de las fermentaciones (fabricación de yogur y vinagre);
fabricación de acetona, butanol, caucho; fabricación de medicamentos como
antibióticos o vitaminas, etc. También se utilizan en investigación genética.
Ingenieria genética que ya comienza a experimentarse para curar enfermedades.
OBJETIVO
La finalidad de esta práctica es acercarte al mundo de las bacterias,
su observación al microscopio, a través de técnicas sencillas de preparación,
fijación y tinción.
Para ello, emplearemos un yogurt, ya que se trata de un alimento
láctico fermentado por bacterias, màs concretamente por Streptococcus
termophilus y Lactobacillus bulgaricus. En las preparaciones a realizar,
podremos observar diferentes morfologías bacterianas.
El pequeño tamaño de las bacterias exige el empleo de grandes aumentos
para verlas. Por otra parte, su resistencia al paso de la luz es semejante a la
del medio en que se encuentran, por lo cual deberá destacarse su presencia
mediante el empleo de un colorante que las tiña, dejando, a la vez, incoloro al
medio circundante.
Se empleará, pues, el mayor aumento posible con el microscopio óptico.
Ello se logra mediante un objetivo especial que se emplea con su lente frontal
sumergida en un aceite especial. Se llama "Objetivo de inmersión",
produce 100 aumentos que no todos los microscopios lo tienen.
Para realizar la tinción deberá realizarse primero la fijación del
material, muerte y estabilización del mismo, lo cual permitirá que no se
modifique con las manipulaciones
posteriores y que el colorante penetre adecuadamente en la muestra.
Realizaremos la fijación mediante calor.
La grasa, abundante en el material que se va a emplear, dificultará la
llegada del colorante a la célula, pues se usará azul de metileno en solución
acuosa, por lo que será necesario eliminarlas mediante un disolvente,
utilizaremos etanol (alcohol).
MATERIALES
Portaobjetos
Cubreobjetos
Yogurt
Asa de siembra o
palillo
Mechero
Pinza
Azul de metileno
Alcohol
Agua
Cuentagotas
Placa petri
Microscopio (con
objetivo de 100x)
Aceite de
inmersión
PROCEDIMIENTO
1.
Antes de comenzar, hemos de asegurarnos de que el porta esté limpio.
2.
A continuación, tomaremos una pequeña cantidad de yogur con un palillo
o asa de siembra y haremos un frotis en la zona central del porta, con ayuda de
una pequeña gota de agua.
3.
Con cuidado y tomando el porta con dos dedos por el borde, con la
muestra hacia arriba y en posición horizontal, pasarlo por la llama del mechero
de modo se se pueda tocar con él el dorso de la mano sin quemarse. Repetir la
operación, siempre probando y sin quemarse, hasta que se haya secado la
muestra. (Este secado de la muestra tiene como finalidad matar las bacterias,
aumentando de este modo su mayor permeabilidad a la tinciión).
4.
Una vez seca la muestra, colocaremos el porta sobre la placa petri y
añadiremos unas gotas de etanol sobre la muestra ya fijada. Esperar unos
minutos. Lavar con agua y escurrir.
5.
Por último, colocaremos nuevamente la preparación sobre la placa de
Petri y añadiremos unas gotas de azul de metileno. Esperaremos cinco minutos y lavaremos con abundante agua.
6.
Colocamos un cubre. Secamos bien la preparación con papel de filtro y
observamos al microscopio, primero a pocos aumentos y luego al máximo aumento
disponible.
ANÁLISIS Y
CONCLUSIONES
a)
Haz el dibujo de una célula procariota típica señalando sus partes.
b)
Dibuja lo que observas y señala en el dibujo las formas bacterianas
que identificas.
c)
¿A qué tipo o tipos morfológicos pertenecen las formas celulares
obsevadas?
Streptococcus thermophilus y Lactobacillus
bulgaricus,
Streptococo (más de dos células con forma
esférica)
Lactobacilos (Habitualmente son benignas e incluso
necesarias, habitan en el cuerpo humano y en el de otros animales. Muchas
especies son importantes en la descomposición de la materia vegetal y animal.)
d)
¿Las bacterias del yogurt son autótrofas o heterótrofas? ¿Por qué?
Los Lactobacilos son bacterias
anaerobias,aerotolerantes y acidófilas que podemos encontrar en el sistema
digestivo y genital de los organismos vivos y
son empleadas en la industria para la preparación del Yogurt. El
comportamiento nutricional del Lactobacilo es mixto, ya que aprovecha los
nutrientes del medio donde se encuentra, y es también capaz de procesar sus
propios nutrientes, como es el caso de la síntesis de ácido láctico que le
proporciona la acidez al yogurt, por lo que esta bacteria es tanto autótrofa
como heterotrofa.
e)
¿Puedes deducir cómo es su respiración? ¿De qué manera?
Las bacterias de leche son anaeróbicas, no
necesitan oxígeno para respirar y obtener la energía. Para esto utilizan el
ácido láctico para obtener respiración y energía: el ácido láctico lo obtienen
gracias a la fermentación.
f)
¿Las bacterias del yogurt son simbióticas, saprófitas o parásitas?
¿Por qué?
Son simbióticas, ya que se alimentan de materia
orgánica sin vida.
g)
¿Qué papel desempeñan las bacterias en la elaboración del yogurt a
partir de la leche?
Las bacterias tienen un papel esencial
en la fermentación de la leche para transformarla en yogur.
h)
¿Qué otros procesos conoces en los que se empleen bacterias para la
elaboración de algún producto alimentario? Explica el proceso
-Vino:
cuando se ha extraído todo el color. Las partes sólidas se llevan a la prensa y
se obtiene el vino de prensa, un vino de menor calidad. Posteriormente
pasaremos a la fermentación, que en tintos se produce en dos fases: la
fermentación propiamente dicha y posteriormente la fermentación maloláctica, por la que el
ácido málico, más “ácido” se convierte en ácido láctico, proceso por el que se
reduce la acidez del vino y se refinan los sabores.
-Mantequilla:
En su caso, es necesario un agriado inicial, causado por los llamados
estreptococos de la leche, para poder separarse después la grasa de la
mantequilla durante el batido. Además, estos microorganismos crean pequeñas
cantidades de acetoína, una sustancia que se oxida de forma espontánea a
diástilo, el compuesto responsable del aroma y sabor de la mantequilla.
